兔角膜內(nèi)皮細(xì)胞是位于兔眼角膜內(nèi)層的單層細(xì)胞，構(gòu)成后彈力層與房水之間的物理屏障，通過(guò)離子“泵”功能調(diào)節(jié)角膜水分和離子濃度，維持角膜透明度和正常生理功能。
 

　　兔角膜內(nèi)皮細(xì)胞細(xì)胞功能：
 

　　維持角膜透明度：通過(guò)離子“泵”功能(如Na?-K?-ATP酶活性)，調(diào)節(jié)角膜中離子濃度和水分，維持角膜半脫水狀態(tài)，保證正常厚度和透明度。若功能紊亂，會(huì)導(dǎo)致角膜水腫，甚至失去透明性。
 

　　屏障作用：構(gòu)成后彈力層和房水之間的物理屏障，防止房水過(guò)度滲入角膜基質(zhì)層。
 

　　合成蛋白功能：角膜作為無(wú)血管組織，其透明性依賴于內(nèi)皮細(xì)胞合成的多種蛋白。
 

　　細(xì)胞培養(yǎng)與應(yīng)用
 

　　培養(yǎng)方法：通常采用混合膠原酶消化結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基進(jìn)行篩選制備。細(xì)胞總量約為5×10? cells/瓶，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等病原體。
 

　　培養(yǎng)條件：
 

　　包被條件：PLL(0.1mg/ml)或明膠(0.1%)。
 

　　培養(yǎng)基：含F(xiàn)BS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等。
 

　　換液頻率：每2-3天換液一次。
 

　　生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)，細(xì)胞形態(tài)呈內(nèi)皮細(xì)胞樣。
 

　　傳代特性：可傳代2-3代，傳代比例為1:2。
 

　　消化液：0.25%胰蛋白酶。
 

　　培養(yǎng)環(huán)境：37℃、5% CO?、飽和濕度。